Pregunta: ¡Hola Marta!, mi pregunta es: ¿Cómo es trabajar manipulando el ADN para construir proteínas fluorescentes y mutantes?

Marta Pulido Sánchez contestada el 10 Nov 2021: last edited 10 Nov 2021 12:33

¡Hola Carla!

En dos palabras: mola muuuuucho. Tenemos muchas herramientas de edición genética para poder copiar, cortar y pegar los trozos de ADN que queramos, y así por ejemplo unir al final de una proteína que me interese otra proteína (la más común es la proteína fluorescente GFP, «Green Fluorescent Protein» aunque hay muchas más de otros colores). Como a partir del ADN se fabrica ARN que se traduce a proteínas, conocemos a la vez la secuencia de la proteína y su equivalencia a ADN… ¿Y cómo hacemos para unir el ADN de mi proteína de interés con el ADN de la proteína fluorescente? *Redoble de tambores*

Nuestra proteína de interés está codificada en el ADN de nuestro bicho, mientras que la proteína fluorescente se saca de la medusa Aequorea victoria (pero como normalmente no tenemos medusas a mano, este trozo de ADN se vende de manera comercial a los laboratorios). Como nosotros queremos rescatar únicamente el trozo de ADN que nos interesa, que es el de nuestra proteína, lo vamos a amplificar con una técnica que seguro que conoces que se llama PCR: una proteína llamada polimerasa va a hacer copias del trozo de ADN que tú quieras que esté delimitado por dos secuencias pequeñitas de ADN sintético que tú le pones a la reacción, y que se llaman oligonucleótidos.

Una vez tienes este trozo de ADN puedes hacerle más cosas (como cortarlo con proteínas que se llaman «enzimas de restricción» y que reconocen pequeñas secuencias específicas de 4-8 nucleótidos del ADN) y ya estará listo para que le peguemos al lado el trozo de ADN de nuestra proteína fluorescente por una proteína que se llama ligasa 🙂

De esta manera, copiando, cortando y pegando podemos ensamblar trozos de ADN como si fueran piezas de lego y construir todo lo que te puedas imaginar!!!